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检测试剂盒

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这里来说说检测试剂盒

正如树有高矮之分,抗体有活力高与低,亲和力强和弱之分,一般来说,普通亲和力与普通特异性的抗体已经能满足免疫组化、免疫印迹或免疫荧光的要求,那更好的高亲和力和高特异性的抗体是不是可以满足更高层次的需求呢?

对于大部分人来说,免疫组化或免疫印迹等的操作方法还是过于复杂。而且实验过程中部分样品需要变性处理,人为的把有空间结构和有活性的蛋白变成线性和失去或部分失去活性的蛋白,再通过抗体去结合,它的好处在于只要是有目的蛋白存在,不管是有活力或无活力的形式,都是可以通过抗体识别出来的。那么有没有一种更简单易于操作的方法,并且可以在蛋白天然活性状态下直接检测的而不需对样本进行预处理呢?

酶联免疫吸附试验(ELISA)和化学发光免疫分析(CLIA)就是这样的能识别天然蛋白操作简单的近代免疫学检测方法。

酶联免疫吸附试验为免疫学中的经典实验,通常其基本原理是:首先将一抗体包被到某固相载体表面,再将另一抗体与某酶连接成酶标抗体。在测定时,把受检标本和酶标抗体按不同的步骤与包被抗体结合形成复合物。洗涤除去复合物以外的物质,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。

化学发光免疫分析包含两个部分,即化学发光分析系统和免疫反应系统。免疫反应系统原理与酶联免疫吸附试验原理基本相同,只是连接的标记物为发光物质而不是酶,不需要显色,由化学发光分析系统完成。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子,利用发光信号测量仪器光量子产率。化学发光免疫分析技术灵敏度高、特异性强、试剂价格低、方法稳定快速、检测范围宽、操作简单更易于自动化。

通常情况下,免疫组化或免疫印迹只需一种是特异性抗体即可完成实验,而ELISA或CLIA则需要二种特异性强且能识别有活性蛋白的抗体或局部片段抗体才能包被完成,因此,它的特异性及灵敏性优于免疫组化和免疫印迹就很好理解了。同样原因于此,不是所有的抗体都能做为ELISA或CLIA的应用选择,配对这一门槛将大部分抗体挡在了门外,它需要更好的高亲和力和高特异性的抗体。

ELISA和CLIA方法学的应用极大的扩大了免疫学在科学研究以及临床诊断上的运用,它操作简单,不需专业背景的人也可操作,借助于微孔板清洗机和微孔板读数仪或化学发光分析仪,实验者只需要按照既定的步骤一步步添加就能获得很好的实验结果。全自动酶免检测系统和全自动化学发光免疫分析系统的推出,彻底解放了整个实验的全部过程,又快又准。

检测试剂盒是一类便于使用的成套试剂,它可以用在哪些地方呢?可以起到什么作用呢?我们知道,蛋白质含量的高低可以直接反映生物体的生命状态以及能预示患病的可能。比如,血液中T3、T4含量的升高可以预示甲亢的可能;尿液中微球蛋白的出现证明肾脏受损的可能;脑脊液中S100B蛋白的升高提示有脑部感染的可能。现在我们只需要采集身体的一点体液就可以对体内的特定蛋白质运用ELISA或CLIA方法快速定量了。这种试剂盒其实就在我们身边,在医院里常做的乙肝“两对半”检查以及艾滋病检查就是用ELISA试剂盒进行的,近年来,用于肿瘤检测的试剂盒已不稀奇。检测试剂盒还广泛用于毒品与兴奋剂的检测,农药残留的检测,水污染检测等等。

分子生物学与免疫学的发展是有目共睹的,还记得2003年的非典吗?不用说治疗,就是确诊都很困难。到现在,仅仅过去10来年,什么禽流感、猪流感,什么埃博拉、中东呼吸综合征,仅仅出现几天,它的祖宗八代都能够弄得清清楚楚,抓住它的基因序列,获取蛋白和抗体就不是难事,研制疫苗与抗体血清也有可能,拿出检测试剂盒只是探囊取物。

云克隆公司近七千种检测试剂盒主要是ELISA试剂盒,也有少部分是CLIA试剂盒,有双抗夹心法与竞争抑制法之分。特色产品有检测灵敏度高的高敏型检测试剂盒;实验耗时短,试剂使用方便的快捷型检测试剂盒;以及只需要少量标本即可检测的小样本检测试剂盒;用于检测抗体的测抗体检测试剂盒;用于检测小分子物质的通用型泛物种检测试剂盒;用于检测二个物种以上靶蛋白的多物种检测试剂盒。这些试剂盒目前基本上都只能用于科学研究,不用于临床诊断,云克隆诊断试剂研究所正在着手逐步将部分指标转化为临床用体外诊断试剂。


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